Reverse Transcriptase Pcr Là Gì

  -  

RT-PCR là gì?

RT-PCR (Reverse Transcription–Polymerase Chain Reaction) là một kỹ thuật có nguồn gốc từ hạt nhân nhằm phát hiện nay sự hiện diện của vật tư di truyền rõ ràng trong những tác nhân gây bệnh, bao gồm cả vi rút. Ban đầu, chuyên môn này sử dụng những chất lưu lại đồng vị phóng xạ để phát hiện những vật liệu di truyền được nhắm mục tiêu. Mặc dù nhiên, quy trình tinh chế tiếp đến đã dẫn đến việc thay thế sửa chữa các chất ghi lại đồng vị phóng xạ bằng những chất tiến công dấu đặc biệt khác, thường là dung dịch nhuộm huỳnh quang. Kỹ thuật này chất nhận được các bên khoa học chú ý thấy kết quả gần như thể ngay mau chóng khi quy trình phân tích vẫn vẫn diễn ra, trong khi PCR thường thì chỉ cung cấp kết quả vào cuối quá trình.

Bạn đang xem: Reverse transcriptase pcr là gì

RT-PCR là trong những xét nghiệm được sử dụng rộng thoải mái nhất hiện giờ để phát hiện vi rút COVID-19. Tuy nhiên, trong khi nhiều non sông đã thực hiện RT-PCR nhằm chẩn đoán những bệnh khác ví như vi rút Ebola cùng vi rút Zika thì nhiều nước nhà vẫn phải được cung ứng trong việc kiểm soát và điều chỉnh kỹ thuật này nhằm chẩn đoán vi rút COVID-19 cũng như nâng cao năng lực xét nghiệm.

*

Vi rút là gì? Vật hóa học di truyền là gì?

Vi rút là một trong gói vật hóa học di truyền cực bé dại được bao quanh bởi một lớp vỏ phân tử. Vật tư di truyền của vi rút rất có thể là acid deoxyribonucleic (ADN) hoặc acid ribonucleic (ARN).

*

ADN là 1 trong phân tử sợi kép, chứa mã di truyền về cách mà những sinh vật xuất hiện và phạt triển. ADN được tìm thấy trong tất cả các sinh thiết bị như động vật, thực vật và vi rút.

ARN là một trong những phân tử sợi đối chọi có chức năng sao chép, phiên mã với truyền những mã di truyền tới protein để tổng thích hợp và triển khai các tác dụng giữ mang lại sinh đồ dùng sống và phát triển. Các biến thể khác nhau của ARN chịu trách nhiệm sao chép, phiên mã và truyền dạt thông tin di truyền.

*

Một số một số loại vi rút như coronavirus SARS-CoV-2 gây ra bệnh COVID-19 chỉ chứa ARN, tức là vi rút nhờ vào việc xâm nhập vào những tế bào mạnh khỏe để nhân lên với tồn tại trong tế bào. Lúc vào vào tế bào, vi rút thực hiện mã di truyền của chính nó để kiểm soát và “lập trình lại” các tế bào, biến những tế bào trong khung người trở thành nhà máy sản xuất sản xuất vi rút.

Để một một số loại vi rút như vi rút COVID-19 được phát hiện tại sớm vào cơ thể bằng cách sử dụng RT-PCR, các nhà khoa học nên chuyển ARN thành ADN. Đây là một quy trình gọi là “phiên mã ngược”. Họ đề xuất làm được vấn đề này vì chỉ ADN mới rất có thể được coppy hoặc khuếch đại nhằm kỹ thuật RT-PCR hoàn toàn có thể phát chỉ ra vi rút.

Các nhà công nghệ khuếch đại một phần ADN vi rút cố kỉnh thể, đã có phiên mã lên hàng nghìn nghìn lần. Vấn đề khuếch đại ADN là hết sức quan trọng. Gắng vì nỗ lực phát hiện tại một lượng nhỏ vi rút trong các hàng triệu chuỗi thông tin di truyền, nhờ khuếch đại mà những nhà khoa học sẽ sở hữu một lượng ADN vi rút đủ bự để xác thực một cách đúng chuẩn rằng vi rút sẽ tồn trên trong cơ thể người.

Xem thêm: Tổng Hợp Những Phần Mềm Hỗ Trợ Chơi Game Không Bị Giật Lag Tốt Nhất Cho Pc

*

RT-PCR chuyển động như cầm cố nào với vi rút COVID-19?

Mẫu xét nghiệm được thu thập từ các bộ phận của cơ thể người, khu vực vi rút COVID-19 tập trung, chẳng hạn như mũi hoặc cổ họng. Mẫu sau khoản thời gian thu thập sẽ tiến hành xử lý bằng một trong những dung dịch hóa học để vứt bỏ các hóa học như protein và chất bự và chỉ chiết xuất ARN bao gồm trong mẫu. ARN được tinh chiết là sự kết hợp giữa vật tư di truyền của chính bạn được lấy mẫu và cả ARN của vi rút COVID-19 (nếu có).

*

ARN được phiên mã ngược thành ADN bằng cách sử dụng một một số loại enzyme. Sau đó, các nhà công nghệ sẽ bổ sung cập nhật thêm các đoạn ADN ngắn cho các phần đích của ADN vi rút. Trường hợp vi rút bao gồm trong mẫu, các đoạn này sẽ auto gắn vào những phần đích của ADN vi rút. Một số trong những đoạn ADN cung cấp được sử dụng để thành lập chuỗi ADN trong quá trình khuếch đại. Một số trong những đoạn ADN khác được thực hiện để xây dựng ADN. Những chất đánh dấu (như dung dịch nhuộm huỳnh quang) sẽ được thêm vào để phát hiện tại sự mãi sau của vi rút.

Sau đó, hỗn hợp được để vào sản phẩm RT-PCR. Máy quay vòng qua ánh nắng mặt trời làm lạnh và có tác dụng nguội hỗn hợp để kích hoạt các phản ứng hóa học cụ thể tạo ra các bạn dạng sao mới, tương đồng với những phần đích của ADN vi rút. Chu kỳ được lặp đi tái diễn để tiếp tục xào luộc các đoạn đích của ADN vi rút. Mỗi chu kỳ luân hồi tăng gấp đôi phiên bản sao ADN vi rút, 2 bản sao biến đổi 4, 4 phiên bản sao thay đổi 8, v.v... Việc tùy chỉnh cấu hình RT-PCR thường trải qua 35 chu kỳ, có nghĩa là vào cuối quá trình, khoảng chừng 35 tỷ phiên bản sao new của ADN vi rút được tạo ra từ mỗi gai vi rút gồm trong mẫu.

Khi các bản sao bắt đầu của ADN vi rút được chế tạo ra, những chất khắc ghi sẽ gắn thêm vào các sợi ADN, tiếp nối giải phóng dung dịch nhuộm huỳnh quang, được máy tính xách tay đo và hiển thị tức thì trên màn hình. Máy tính xách tay theo dõi lượng huỳnh quang quẻ trong mẫu mã sau từng chu kỳ. Lúc vượt qua một mức độ huỳnh quang tốt nhất định, điều này chứng thực rằng vi rút đang tồn tại. Các nhà kỹ thuật cũng theo dõi cần bao nhiêu chu kỳ luân hồi để đã có được mức độ huỳnh quang đãng này để mong tính mức độ cực kỳ nghiêm trọng của nhiễm vi rút COVID-19: càng ít chu kỳ, nhiễm vi rút càng nặng trĩu !

*

Tại sao áp dụng RT-PCR?

Kỹ thuật RT-PCR bao gồm độ nhạy cùng độ đặc hiệu cao, rất có thể đưa ra chẩn đoán an toàn và đáng tin cậy trong vòng tối thiểu là 3 giờ, tuy vậy thông thường các phòng thí nghiệm mất trung bình từ 6-8 giờ. So với các cách thức phân lập vi rút hiện gồm khác, RT-PCR nhanh hơn đáng kể và kỹ năng sai sót thấp rộng vì cục bộ quy trình được triển khai trong một ống kín. Đây là phương pháp chính xác duy nhất hiện gồm để phát hiện nay vi rút COVID-19.

Tuy nhiên, RT-PCR thiết yếu phát hiện các trường hợp đã có lần nhiễm vi rút trong quá khứ. Điều này rất quan trọng đặc biệt để hiểu sự phát triển và lan truyền của vi rút vì vi rút chỉ hiện diện trong khung người người trong một khoảng thời gian nhất định. Các phương thức khác là cần thiết để phát hiện, theo dõi và quan sát và phân tích các bệnh dịch nhiễm trùng trong thừa khứ, nhất là những bệnh hoàn toàn có thể đã cải tiến và phát triển và lây lan nhưng không có thể hiện triệu chứng.

PCR là gì cùng khác gì với RT-PCR?

RT-PCR là 1 trong những phiên phiên bản của PCR. Nhì kỹ thuật áp dụng cùng một các bước nhưng RT-PCR gồm thêm một cách phiên mã ngược, đưa ARN thành ADN để chất nhận được khuếch đại ADN. Điều này có nghĩa là, PCR được sử dụng cho các tác nhân gây căn bệnh như vi rút và vi khuẩn đã đựng sẵn ADN để khuếch đại, trong khi RT-PCR được sử dụng cho các tác nhân gây bệnh chứa ARN cần được phiên mã thành ADN để khuếch đại. Cả hai kỹ thuật phần lớn cho công dụng gần như ngay lập tức lập tức, nhưng lại RT-PCR hiển thị công dụng ngay lúc phản ứng đang xảy ra còn PCR hiển thị kết quả sau khi phản ứng kết thúc.

Xem thêm: Code Ngôi Sao Hoàng Cung 360Mobi, Gift Code Ngoi Sao Hoang Cung

PCR là một trong những xét nghiệm chẩn đoán đã có sử dụng rộng thoải mái để phân phát hiện những tác nhân tạo bệnh, bao hàm cả vi rút tạo ra các bệnh như Ebola, thổ tả lợn Châu Phi và dịch lở mồm long móng. Vì chưng vi rút COVID-19 chỉ chứa ARN nên RT-PCR được áp dụng để phát hiện tại vi rút COVID-19.

Trong hơn 20 năm IAEA bắt tay hợp tác với FAO, họ đã đào tạo và huấn luyện và trang bị mang đến các chuyên gia từ khắp chỗ trên trái đất về cách sử dụng kỹ thuật RT-PCR thông qua Mạng lưới các phòng phân tích chẩn đoán thú y (VETLAB). Ngay sát đây, kỹ thuật này cũng được sử dụng nhằm chẩn đoán các bệnh khác ví như Ebola, Zika, hội triệu chứng hô hấp Trung Đông (Middle East respiratory syndrome - MERS) và hội chứng hô hấp cấp cho tính nghiêm trọng (Severe Acute Respiratory Syndrome - SARS),v.v...

RT-PCR cũng sẽ được sử dụng nhằm phát hiện những bệnh lan truyền từ động vật sang người: sự thật rằng các bệnh từ động vật cũng có thể lây nhiễm sang người!